作者：吴蕾,黄明辉,赵建龙,杨梦苏 单位：中国科学院生物物理研究所;中国生物物理学会 出版：《生物化学与生物物理进展》2005年第12期 页数：11页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFSHSW2005120050 DOC编号：DOCSHSW2005120059 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
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    • Taq聚合酶(Taqpol)、失去核酸酶结构域的鼠白血病逆转录酶(MMLVRT-)和人源的聚合酶#(pol$)缺少3′→5′外切核酸酶活性.利用表面等离子激元共振(SPR)生物传感器，研究了Taqpol与引物末端完全匹配和含有1、2、3个错配碱基的DNA模板-引物(T-P)的结合动力学，并分析比较了在“正确”或“错误”dNMP环境中Taqpol和引物末端完全匹配的DNAT-P的结合.实验结果表明，随着引物末端错配碱基逐个增加，Taqpol和DNA的结合亲和力呈下降趋势，说明增强和引物末端完全匹配的DNAT-P的亲和力是Taqpol选择正确配对碱基的途径之一.在“错误”的dNMP环境中，Taqpol与DNAT-P的结合动力学能够用简单的1∶1Langmuir模型进行拟合，但是MMLVRT-与DNAT-P的结合动力学可能存在构象变化.而在“正确”的dNMP环境中，Taqpol或MMLVRT-与DNAT-P的结合符合构象变化模型，而且亲和力常数分别是无dNMP时的20倍和64倍，说明“正确”的dNMP诱导酶(Taqpol或MMLVRT-)-DNA复合物发生构象变.....。

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