作者:张松柏,郑丽英,胡霞,沈广宇,刘学文,沈国励,俞汝勤 单位:中国化学会;中国科学院长春应用化学研究所 出版:《》 页数:7页  (PDF与DOC格式可能不同) PDF编号:PDFFXHX2015110130 DOC编号:DOCFXHX2015110139 下载格式:PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑
  • 利用目标蛋白、适体探针、挂锁探针和与适体探针匹配的互补序列之间的竞争反应,发展了一种基于滚环扩增的高灵敏荧光适配体传感器。在不含目标蛋白时,互补序列由于与适体探针杂交形成双链,因此不能与挂锁探针杂交以触发连接-滚环放大反应。相反,有目标蛋白存在时,由于目标蛋白与适体探针结合,使得互补序列被置换下来,从而可以与挂锁探针杂交。在DNA连接酶的作用下,挂锁探针被进一步环化并在Phi 29 DNA聚合酶的作用下发生滚环扩增反应。扩增产物含有许多能与分子信标检测探针环状部分杂交的重复序列,从而分子信标被打开产生荧光信号。对互补序列的长度及挂锁探针的浓度进行了考察。在优化的实验条件下,本传感系统可以实现对的凝血酶高灵敏检测,线性范围为0.067~32 nmol/L,检出限为0.03 nmol/L(约90 amol目标分子)。通过设计不同的适体探针和相关核酸序列,本传感系统可以作为一种通用型方法用于其它目标物的分析。

    提示:百度云已更名为百度网盘(百度盘),天翼云盘、微盘下载地址……暂未提供。