作者：海洪,黄文刚,梁顺超,李建平 单位：中国化学会;中国科学院长春应用化学研究所 出版：《》 页数：8页  （PDF与DOC格式可能不同） PDF编号：PDFFXHX2016050190 DOC编号：DOCFXHX2016050199 下载格式：PDF + Word/doc 文字可复制、可编辑

    • 利用切刻内切酶的酶切作用实现信号放大，结合量子点高效的电化学发光性能，构建了一种新型电化学发光DNA生物传感器。将捕获探针DNA(c-DNA)通过自组装的方式固定到金电极表面，后与目标DNA(t-DNA)互补杂交形成双链DNA，利用切刻内切酶Nt.Bst NBI特异性识别双链上的酶切位点(5'-GAGTC-3')，然后在c-DNA相应的切割位点(识别序列3'端后的4个碱基处)对其进行剪切，释放出目标链，参与下一轮的杂交及酶切，通过目标物的循环利用，实现信号放大。利用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-3-二甲基氨丙基碳化二亚胺(EDC)活化羧基化Cd Te量子点表面的羧基，与电极表面残留的c-DNA末端的氨基共价交联，通过测定捕获的量子点的电化学发光信号对目标DNA进行检测。优化后的检测条件为：c-DNA浓度1μmol/L，杂交时间60 min，Nt.Bst NBI浓度0.5 U/μL，酶切反应时间4 h。在优化条件下，目标DNA浓度在2.0&#215；10~(-13)~2.0&#215；10~(-11)mol/L范围内，其对数与电化学发光强度呈线性关系，检出限为7......。

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